13778150,Lipofectamine RNAiMAX转染试剂

       赛默飞旗下的Invitrogen Lipofectamine RNAiMAX转染试剂是一种专为将Stealth? RNAi或短干扰RNA（siRNA）高效递送至

哺乳动物细胞中从而进行RNAi分析而开发的具有技术的制剂 。它能在多种细胞系中实现极高的转染效率，包括常见细胞类型、

干细胞、原代细胞以及传统上难以转染的细胞类型 。

一： 13778150,Lipofectamine RNAiMAX转染试剂产品优势：

高效转染：在多种细胞类型中具有高转染效率，可减少未转染细胞的背景表达，限度地提高基因敲低效果。

1. 低细胞毒性：细胞毒性谱低，可减少非特异性效应和细胞应激。

2. 低试剂用量：通常在低siRNA浓度下即可实现高基因敲低水平，进一步降低非特异性效应。

3.  操作宽容度高：具有宽泛的*佳转染活性峰值，即使细胞密度存在差异、移液有小误差或其他变化，也能实现高基因敲低水平。

二： 操作步骤（以24孔板正向转染为例）

1. 转染前准备：转染前一天，在500?L不含抗生素的生长培养基中对细胞进行铺板，使转染时细胞汇合度为30%-50%。

2. 制备复合物：用50?L不含血清的Opti - MEM I减血清培养基稀释6pmol RNAi双链体，轻轻混匀；取1?L Lipofectamine RNAiMAX在50?L Opti - MEM I减血清培养基中稀释，轻轻混匀；将两者混合，轻轻混匀并在室温下孵育10 - 20分钟。

3. 添加复合物到细胞中：将复合物添加至含有细胞的每个孔内，使*终体积为600?L，*终RNA浓度为10nM，轻轻前后晃动培养板混匀。

4. 细胞孵育：在CO?培养箱中于37°C下孵育细胞24 - 48小时，直至准备好检测基因敲低效果，培养基可在4 - 6小时后更换。